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技術(shù)文章
說說實(shí)驗(yàn)室鹽酸羥胺緩沖液常見的組成
更新時間:2020-03-29
鹽酸羥胺緩沖液
通常是由弱酸及其共軛堿或弱堿及其共軛酸緩沖對所組成的溶液,能夠在加入一定量其他物質(zhì)時減緩pH的改變。以生物實(shí)驗(yàn)中較常用的一種緩沖液PBS為例,是由Na2HPO4、KH2PO4組成的緩沖對,在PH5.8-8.0范圍內(nèi)有較強(qiáng)的緩沖能力。
水合氫離子的濃度取決于弱酸與其共軛堿的濃度比。當(dāng)加入少量強(qiáng)堿時,酸被中和,導(dǎo)致了氫氧根離子在溶液中很少累積,從而的濃度增加,的濃度減少??梢钥吹剑m然加入了強(qiáng)堿,但是溶液里的氫氧根離子變化很少,同時,
濃度較大,相對的變化小,兩者比值幾乎無變化,因此根據(jù)公式,水合氫離子的濃度變化很小。加入弱酸則是同樣的道理。由于在大濃度基數(shù)上的微小變化不會改變比值,也因此維持了體系內(nèi)氫離子和氫氧根離子濃度的平衡。
而生化實(shí)驗(yàn)室常用的緩沖系主要有磷酸、檸檬酸、碳酸、醋酸、巴比妥酸、Tris(三羥甲基氨基甲烷)等系統(tǒng),生化實(shí)驗(yàn)或研究工作中要慎重地選擇緩沖體系,因?yàn)橛袝r影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的因素并不是
鹽酸羥胺緩沖液
的pH值,而是緩沖液中的某種離子。如硼酸鹽、檸檬酸鹽、磷酸鹽和三羥甲基甲烷等緩沖劑都可能產(chǎn)生不需要的化學(xué)反應(yīng)。
硼酸鹽:硼酸鹽與許多化合物形成復(fù)鹽、如蔗糖。
檸檬酸鹽:檸檬酸鹽離子容易與鈣結(jié)合,所以存在有鈣離子的情況下不能使用。
磷酸鹽:在有些實(shí)驗(yàn),它是酶的抑止劑或甚至是一個代謝物,重金屬易以磷酸鹽的形式從溶液中沉淀出來。而且它在pH7.5以上時緩沖能力很小。
三羥甲基氨基甲烷:它可以和重金屬一起作用,但在有些系統(tǒng)中也起抑制作用。其主要缺點(diǎn)時溫度效應(yīng)。這點(diǎn)往往被忽視,在室溫pH是7.8的Tris緩沖液,4℃時是8.4,37℃時是7.4,因此,4℃配制的緩沖液在37℃進(jìn)行測量時,其氫離子濃度就增加了10倍。在pH7.5以下,其緩沖能力極為不理想。
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